? 液相色譜柱頭的過(guò)濾篩板的日常維護(hù)和更換！
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液相色譜柱頭的過(guò)濾篩板對(duì)保護(hù)色譜柱、維持分離性能至關(guān)重要，其日常維護(hù)和更換的操作及要點(diǎn)如下：
1. 過(guò)濾篩板的作用
過(guò)濾篩板作為色譜柱入口的 “防護(hù)屏障”，主要功能是攔截樣品及流動(dòng)相中的固體顆粒(如不溶物、結(jié)晶)、微生物、氣泡等雜質(zhì)，防止其進(jìn)入色譜柱內(nèi)部堵塞固定相孔隙或劃傷柱管，從而有效延長(zhǎng)色譜柱使用壽命，保障分離效率和峰形質(zhì)量。此外，它還能避免雜質(zhì)干擾色譜分離過(guò)程，防止基線漂移、鬼峰出現(xiàn)等問(wèn)題，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
2. 日常維護(hù)方法
流動(dòng)相預(yù)處理：使用 0.22μm 或 0.45μm 的濾膜對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾，水相推薦使用纖維素濾膜，有機(jī)相采用聚四氟乙烯濾膜。過(guò)濾后的流動(dòng)相應(yīng)盡快使用，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中再次引入雜質(zhì)。
樣品處理規(guī)范：所有樣品在進(jìn)樣前必須經(jīng)過(guò) 0.22μm 濾膜過(guò)濾，對(duì)于渾濁或含懸浮物的樣品，應(yīng)先離心(通常 5000 – 10000 rpm，5 – 10 分鐘)去除大顆粒物質(zhì)后再過(guò)濾。若樣品為固體，需完全溶解并冷卻至室溫后過(guò)濾。
定期沖洗維護(hù)：每次分析結(jié)束后，使用高比例有機(jī)相(如 90% 甲醇或乙腈)以 0.3 – 0.5 mL/min 的流速反向沖洗色譜柱 30 – 60 分鐘，去除強(qiáng)保留物質(zhì);若分析過(guò)程使用了緩沖鹽，需先用 10% – 20% 的水 – 有機(jī)相混合溶液(如 10% 甲醇水溶液)沖洗 30 分鐘，再用高比例有機(jī)相沖洗，防止鹽結(jié)晶堵塞篩板。
前置保護(hù)措施：在色譜柱前端安裝保護(hù)柱或在線過(guò)濾器，其填料與主色譜柱一致或兼容，定期(如每分析 50 – 100 個(gè)樣品)更換保護(hù)柱，減少主色譜柱篩板的污染負(fù)荷。
壓力控制要求：在儀器啟動(dòng)、流速調(diào)節(jié)或更換流動(dòng)相時(shí)，需緩慢操作，流速變化梯度不超過(guò) 0.2 mL/min，避免壓力驟變(如瞬間壓力波動(dòng)超過(guò) 20 bar)對(duì)篩板造成機(jī)械損傷。
3. 篩板更換的時(shí)機(jī)
當(dāng)出現(xiàn)以下情況時(shí)，需考慮更換篩板：
柱壓異常：在相同流速和流動(dòng)相條件下，柱壓持續(xù)升高且超過(guò)正常工作壓力的 30% – 50%，經(jīng)沖洗色譜柱、檢查管路和脫氣流動(dòng)相后仍無(wú)法恢復(fù)。
流速異常：設(shè)定流速與實(shí)際流速偏差超過(guò) 10%，且排除了泵系統(tǒng)故障和管路堵塞問(wèn)題。
峰形畸變：色譜峰出現(xiàn)嚴(yán)重拖尾、分叉、展寬等現(xiàn)象，峰不對(duì)稱(chēng)因子(As)偏離正常范圍(0.9 – 1.2)，且通過(guò)優(yōu)化色譜條件和清洗色譜柱無(wú)法改善。
樣品回收率低：已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品回收率顯著降低(如低于 80%)，排除樣品前處理和色譜分離問(wèn)題后，可能是篩板堵塞導(dǎo)致樣品吸附或擴(kuò)散異常。
4. 篩板更換方法
工具材料準(zhǔn)備：準(zhǔn)備與色譜柱規(guī)格匹配的新篩板(注意孔徑、材質(zhì)和尺寸，如常見(jiàn)孔徑為 2μm 或 0.5μm，材質(zhì)有不銹鋼、鈦合金或高分子聚合物)、專(zhuān)用扳手、鑷子、無(wú)塵擦拭紙、色譜級(jí)甲醇或乙腈、密封墊片(如有)。
拆卸操作規(guī)范：關(guān)閉色譜儀，待系統(tǒng)壓力降為 0 后，小心旋下色譜柱柱頭螺帽(注意保存好螺帽和密封墊片)，使用鑷子或?qū)Ｓ霉ぞ咻p輕取出舊篩板，避免損傷柱頭內(nèi)部結(jié)構(gòu)。若篩板粘連，可滴加少量甲醇浸潤(rùn)后再取出。
新篩板安裝：用鑷子夾持新篩板，確保其平整放入柱頭凹槽內(nèi)，安裝好密封墊片，旋緊螺帽至適度扭矩(參考色譜柱說(shuō)明書(shū)推薦值，一般為 10 – 15 N?m)，避免過(guò)緊損壞柱體或過(guò)松導(dǎo)致漏液。
安裝后檢查：將色譜柱重新連接到系統(tǒng)，以 0.2 mL/min 的流速用甲醇沖洗 10 分鐘，檢查連接處是否漏液，隨后逐漸升高流速至正常分析條件，觀察柱壓和基線是否穩(wěn)定。
5. 篩板清洗方法
反向沖洗法：適用于輕度污染，將色譜柱反向連接到輸液泵，以 0.3 – 0.5 mL/min 的流速用流動(dòng)相或高比例有機(jī)相沖洗 30 – 60 分鐘。注意：僅適用于可反向使用的色譜柱(需查看說(shuō)明書(shū)確認(rèn))。
超聲波清洗法：僅適用于可拆卸篩板(部分色譜柱允許)。將篩板小心取出后，放入盛有甲醇或乙腈的玻璃容器中，在超聲波清洗器中清洗 10 – 15 分鐘，期間避免超聲功率過(guò)高(建議不超過(guò) 300 W)。清洗后用超純水沖洗，晾干備用。
化學(xué)清洗法：僅適用于不銹鋼材質(zhì)篩板，且需謹(jǐn)慎使用。使用 5% 硝酸溶液浸泡 1 – 2 小時(shí)可去除金屬氧化物雜質(zhì);10% 氫氧化鈉溶液可溶解蛋白質(zhì)等有機(jī)污染物，但需嚴(yán)格控制浸泡時(shí)間(不超過(guò) 30 分鐘)，清洗后立即用大量超純水沖洗至中性，避免殘留試劑腐蝕色譜柱。嚴(yán)禁對(duì)硅膠基質(zhì)色譜柱使用化學(xué)清洗法。
高壓氣體清洗法：需使用專(zhuān)門(mén)的色譜柱清洗裝置，控制氣體壓力在 5 – 10 bar，緩慢吹掃篩板，每次吹掃時(shí)間不超過(guò) 30 秒，重復(fù) 3 – 5 次。操作時(shí)需嚴(yán)格控制壓力，防止篩板破裂或固定相流失。
6. 注意事項(xiàng)
工具使用規(guī)范：避免使用尖銳或粗糙工具(如普通剪刀、砂紙)接觸篩板，防止劃傷篩板表面或破壞篩板結(jié)構(gòu)。
操作遵循說(shuō)明：嚴(yán)格按照色譜柱廠商提供的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行篩板清洗和更換操作，不同品牌和型號(hào)的色譜柱可能存在結(jié)構(gòu)差異，如部分色譜柱不允許拆卸篩板或反向沖洗。
系統(tǒng)定期維護(hù)：每月檢查一次保護(hù)柱、在線過(guò)濾器和篩板的污染情況;每季度對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行全面維護(hù)，包括檢查泵密封圈、進(jìn)樣閥、檢測(cè)器流通池等部件，確保整個(gè)系統(tǒng)運(yùn)行正常。
發(fā)布于: 2024-01-05